By this author

INCREASING THE SENSITIVITY OF IMMUNOCHROMATOGRAPHIC ASSAY FOR PENICILLIN DETERMINATION IN MILK DUE TO ORIENTED IMMOBILIZATION OF PENICILLIN-BINDING PROTEIN ON THE SURFACE OF COLLOIDAL GOLD

Issue number 6 from 25.02.2025

Проведено сравнение чувствительности конкурентного иммунохроматографического анализа (ИХА) для определения пенициллина в молоке с применением конъюгатов коллоидного золота (КЗ) с рекомбинантным пенициллин-связывающим белком (ПСБ), приготовленных двумя методами - пассивной неориентированной иммобилизацией или посредством ориентированной иммобилизации при помощи антител к гистидиновой метке. Предел обнаружения оптимизированного ИХА с неориентированной иммобилизацией ПСБ составил 5 нг/мл. Используя ориентированную иммобилизацию ПСБ за счет антител к гистидиновой метке, удалось достичь предела обнаружения до 0.3 нг/мл при визуальной интерпретации. Время проведения анализа составило 10 мин. Проведено сравнение эффективности двух методов иммобилизации ПСБ. Показано, что увеличение чувствительности анализа обусловлено улучшением ориентации ПСБ и одновременным уменьшением количества связывающих сайтов на КЗ. Таким образом, ориентированная иммобилизация специфических белков на сенсорных поверхностях с использованием антител к гистидиновой метке может увеличить чувствительность анализа и одновременно уменьшить количество используемых биоспецифических реагентов. Данный подход может быть применен для простой конъюгации рекомбинантных белков с гистидиновой меткой с наночастицами.

13 0