By this author

DEVELOPMENT AND VALIDATION OF AN IMMUNOCHROMATOGRAPHIC TEST SYSTEM FOR THE DETERMINATION OF OKADAIC ACID IN SEAFOOD

Issue number 5 from 15.05.2025

Окадаевая кислота (ОК) и ее производные, динофизистоксины, относятся к группе диарейных токсинов (DSP-токсины), которые продуцируются токсинообразующими динофлагеллятами. При поглощении водорослей моллюсками DSP-токсины концентрируются в жировой ткани животных и могут привести к острому отравлению человека при их потреблении. Нами разработана простая, чувствительная и специфичная тест-система для обнаружения и полуколичественного экспресс-определения ОК и ее производных в моллюсках, основанная на прямом конкурентном иммунохроматографическом анализе. На тест-полосках имеются три линии связывания иммунореагентов - тестовая, контрольная и внутренняя линия сравнения, интенсивность окрашивания которой не зависит от концентрации ОК в растворе и сопоставима с интенсивностью окрашивания тестовой линии. При наличии DSP-токсинов в пробе интенсивность окрашивания тестовой линии снижается относительно линии сравнения, что позволяет выявлять присутствие токсинов в пробах. Пробоподготовка включает в себя экстракцию гомогенатов тканей моллюсков метанолом с последующим разведением экстракта раствором для анализа. Тест-полоски изготовлены в формате dip-stick, и процедура анализа заключается в погружении части тест-полоски в пробу на несколько секунд с обработкой результатов через 30мин. Суммарная продолжительность анализа с учетом пробоподготовки образцов составляет около 1ч. Тест-система позволяет достоверно обнаруживать и полуколичественно определять ОК в различных моллюсках (устрицы, мидии, вонголе, трубач, морские гребешки) при содержании токсина не более 40 нг/г (визуальный способ регистрации результатов) и не более 10 нг/г (инструментальный способ регистрации результатов), что значительно ниже предельно допустимой концентрации для ОК, установленной Всемирной организацией здравоохранения и Роспотребнадзором (160 нг/г). Кроме ОК, тест-система способна выявлять в моллюсках и ее производные - динофизистоксин-1 и динофизистоксин-2. Разработанная иммунохроматографическая тест-система может быть использована для мониторинга содержания токсинов ОК-группы в моллюсках в России.

53 0