Статьи автора

Одновременное определение биологически активных компонентов <i>Rhodiola rosea</i> в экстрактах растительного сырья методом ГИХ-МС/МС

Номер выпуска 2 от 01.02.2025

Разработан простой, экспрессный и высокочувствительный способ одновременного определения основных компонентов Rhodiola rosea (розина, салидрозида, розарина и розавина) в широком диапазоне концентраций методом гидрофильной хроматографии–тандемной масс-спектрометрии. Выбраны условия извлечения (тип и состав экстрагента, время экстракции) основных компонентов из образцов корней Rhodiola rosea, хроматографического разделения и детектирования этих соединений, а также оценены метрологические характеристики предложенного подхода. Пределы обнаружения составили 250, 2.4, 2.3, 5.4 нг/мл, а линейные диапазоны определяемых концентраций – 1–100, 0.01–10, 0.01–10 и 0.01–100 мкг/мл для розина, салидрозида, розарина и розавина соответственно. Разработанный подход опробован в анализе реальных образцов фармпрепарата и растительного сырья.

12 0

Исследование влияния рентгеновского излучения на структурные характеристики белка бычьего сывороточного альбумина с использованием жидкостной хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

Номер выпуска 3 от 07.12.2025

Разработан и опробован способ оценки изменений структурных характеристик белка бычьего сывороточного альбумина (БСА) в водном растворе в результате воздействия ионизирующего излучения. Способ состоит в идентификации уникальных пептидов доменных структур белка, а также установлении модификаций аминокислотной последовательности с использованием жидкостной хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения. Раствор БСА облучали рентгеновским излучением с напряжением на трубке 80 кВ и средним значением тока 1 мА, мощность дозы составляла 2 Гр/с. Поглощенную дозу в объеме образца оценивали ферросульфатным методом дозиметрии. Водный раствора БСА облучали в дозах 0.1, 0.5, 1, 2, 4 и 8 кГр, после чего количественно оценивали содержание белковых молекул в растворе и анализировали структурную целостность нативной формы белка, а также устанавливали модификации аминокислот в последовательности БСА в результате действия излучения. Для более углубленного анализа проводили восстановление дисульфидных связей цистеин-цистеин БСА с последующим алкилированием образующихся тиольных остатков амидом бромуксусной кислоты. Ферментативный гидролиз БСА проводили с добавлением раствора трипсина. Полученные образцы анализировали методом жидкостной хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения с тандемным масс-спектрометрическим детектированием высокого разрешения. Далее оценивали изменение количества неповрежденных молекул белка методом определения уникальных пептидов, соответствующих каждому из трех доменов, из которых состоит аминокислотная последовательность БСА. С учетом оптимизации условий детектирования трех доменов как маркеров активной формы БСА рассчитывали предел обнаружения каждого пептида. Разработанный подход позволил установить изменение естественной конформации белка бычьего сывороточного альбумина (его денатурацию) в водных пробах в результате воздействия ионизирующего излучения в дозах 4–8 кГр при средней мощности 2 Гр/с.

34 0